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化学修饰的siRNA对乳腺癌细胞VEGF基因表达抑制及凋亡的诱导作用

         

摘要

目的:体外水平探讨化学修饰的小干扰RNA(siRNA)介导的RNAi治疗乳腺癌的可行性。方法:选用阳离子脂质体Lipo-fectamine 2000TM作为转染试剂,将化学修饰的针对人VEGF基因的siRNA转染人类乳腺癌细胞株MCF-7。半定量RT-PCR和蛋白印迹试验分别检测转染前后细胞中VEGF、Bcl-2和bax mRNA和蛋白水平表达的变化,Hoechst 33258荧光染色分析细胞凋亡。结果:与未转染的正常细胞组相比,靶向VEGF基因的siRNA转染MCF-7后,细胞中VEGF及Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平显著降低,P<0.01。bax基因的表达未发生明显变化,Bcl-2和bax比值下降。Hoechst 33258荧光染色显示转染siRNA 72 h后细胞内可见凋亡小体。结论:化学修饰的siRNA介导的RNAi下调靶基因VEGF的表达,并对MCF-7细胞有明显的凋亡诱导作用。

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