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神经干细胞植入大鼠缺损皮肤对创面神经修复的影响

         

摘要

目的:探讨酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF)体外诱导大鼠骨髓间质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为神经干细胞(neural stem cells,NSCs)后,植入缺损皮肤对创面神经修复的作用及方式。方法:分离培养SD大鼠BMSCs,利用aFGF诱导其向NSCs分化,并用DAPI荧光标记物进行标记。将81只SD大鼠背部作皮肤全层缺损创面,每组9只。随机分为局部创面注射NSCs(A)组、尾静脉注射NSCs(B)组、NSCs+血浆支架(局部外敷料组)(C)组、局部创面注射BMSCs(D)组、尾静脉注射BMSCs(E)组、BMSCs+血浆支架组(局部外敷料组)(F)组、血浆支架(局部外敷料)(G)组、局部创面注射等量生理盐水(H)组、尾静脉注射等量生理盐水(I组),创面模型在各种移植处理后的第4、5、7周取材,免疫荧光及RT-PCR检测皮肤表皮下及真皮层蛋白基因产物(protein gene product,PGP)9.5的表达。结果:PGP 9.5在创面愈合后第4、5、7周的荧光密度分布,在时间上采用重复资料分析,差异有统计学意义(F=427.03,P=0.000),干细胞移植对神经修复特异性表达有差异;在分组上采用重复资料分析,差异有统计学意义(F=130.44,P=0.000),干细胞移植在时间及分组上的相互作用结果差异有统计学意义(F=3.543,P=0.001)。NSCs局部注射移植后神经修复作用较NSCs尾静脉注射移植明显(P=0.001),NSCs尾静脉注射移植后神经修复较NSCs外敷料移植明显(P=0.000),而NSCs局部注射移植后神经修复作用较BMSCs局部注射移植后明显(P=0.000),BMSCs局部注射移植后神经修复作用较生理盐水局部注射移植后明显(P=0.000),血浆局部外辅料移植与生理盐水的局部注射移植之间差异有统计学意义(P=0.014),生理盐水的局部注射移植与尾静脉注射移植之间差异无统计学意义(P=0.446),RT-PCR检测PGP 9.5基因表达的测定更进一步说明了以上结果。结论:aFGF诱导BMSCs分化为NSCs后,植入皮肤缺损促进皮肤创面神经修复的效果较单纯植入BMSCs强,且以局部注射效果最为显著。

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