人骨保护素在毕赤酵母中的分泌表达及表达产物的生物活性分析(英文)

刘继中; 陈苏民; 李毅; 胡蕴玉; 纪宗玲; 杨彤涛

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为了在毕赤酵母表达系统中分泌表达人骨保护素 (osteoprotegerin ,OPG) ,以人骨肉瘤细胞系MG6 3的mRNA为模板 ,采用RT PCR法得到人OPG编码区cDNA ,克隆入毕赤酵母表达载体pPICZ B ,电转化毕赤酵母GS115 (Mut+) ,经 3%甲醇诱导分泌表达人OPG与组氨酸的融合蛋白 .SDS PAGE及Western印迹分析表明 ,有分子量约 6 6kD的目的蛋白表达 .纯化后的表达产物加入体外培养的小鼠骨髓细胞培养基中 ,当浓度为 10 0ng ml时 ,象牙片上骨吸收陷窝的数量及玻片上的TRAP阳性多核细胞的数量均减少 (P <0 0 5 ) .而同时加入人OPG的多克隆抗体后 ,这一抑制作用可被拮抗 ,在浓度为 5 0ng ml时则无此作用 .人OPG蛋白在酵母系统的成功表达 ,为该蛋白的进一步应用研究提供了依据 .

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2003年第5期|566-571|共6页
作者
刘继中; 陈苏民; 李毅; 胡蕴玉; 纪宗玲; 杨彤涛;
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作者单位

西京医院全军骨科研究所;

第四军医大学生物化学和分子生物学教研室;

唐都医院骨科;

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正文语种 chi
中图分类基因的表达;蛋白质;
关键词
人骨保护素; 毕赤酵母; 分泌表达; 表达产物; 生物活性;

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