牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体的构建及其在SP2/0细胞中的表达

宫强; 刘思国

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目的构建牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中表达。方法利用PCR技术和重叠延伸剪接(SOE)技术扩增牛分枝杆菌ag85b、mpb64、esat-6基因和mpb64-ag85b融合基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建重组质粒pcMAE。将该重组质粒体外转染SP2/0细胞,间接免疫荧光法检测目的基因的表达。结果真核表达质粒pcMAE经酶切鉴定及测序,证实构建正确,转染后SP2/0细胞膜上出现均质的蓝绿色荧光。结论已成功构建了牛分枝杆菌mpb64-ag85b-esat-6融合基因真核表达载体,并在SP2/0细胞中获得表达,为进一步研制牛结核病多基因融合DNA疫苗奠定了基础。

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来源
《中国生物制品学杂志》 |2008年第7期|565-567|共3页
作者
宫强; 刘思国;
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作者单位

河南科技大学食品与生物工程学院;

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因载体;基因的表达;
关键词
牛分枝杆菌; 融合基因; 真核表达; SP2/0细胞;

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