乏氧诱导因子-1α基因沉默对肺癌细胞乏氧应答相关基因表达的影响

宋现让; 宋宝; 魏玲; 柳永蕾; 王兴武

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乏氧诱导因子-1α基因沉默对肺癌细胞乏氧应答相关基因表达的影响

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乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)是肿瘤细胞适应乏氧微环境的关键调控因子,具有作为治疗靶基因的潜力,以克服乏氧诱导的治疗抗拒等效应.下调其表达可能影响肿瘤细胞内一系列乏氧应答相关基因的表达.本研究采用已构建的HIF-1αRNAi慢病毒载体转导肺腺癌A549细胞,经杀稻瘟素(blasticidin)筛选建立HIF-1α基因稳定沉默的A549细胞株.应用cDNA微阵列技术检测并比较HIF-1α基因沉默A549细胞株和其亲本细胞株在常氧和乏氧状态下的基因表达谱改变.应用定量RT-PCR方法验证部分cDNA芯片差异表达基因的表达改变.HIF-1α基因稳定沉默细胞株A549/HIF-1α(-),在常氧和乏氧条件下HIF-1α mRNA水平分别较A549细胞下降89.2%和88.1%,HIF-1α蛋白水平分别下降97.2%和88.4%.在乏氧条件下,cDNA微阵列检测的1280个基因中,52个基因表达上调,15个基因表达下调.HIF-1α基因沉默显著影响其中27个基因的乏氧诱导效应.定量RT-PCR验证其中ENO2、BCL-2、CXCR4和MMP11的表达水平,与cDNA芯片结果相符合.结果提示,HIF-1α基因沉默能够在一定程度上阻断肺癌细胞的乏氧应答,在克服乏氧导致的肺癌治疗抗拒方面具有潜力.

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2007年第10期|864-869|共6页
作者
宋现让; 宋宝; 魏玲; 柳永蕾; 王兴武;
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作者单位

山东省肿瘤医院基础研究中心;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类肺肿瘤;
关键词
乏氧诱导因子-1α; RNA干扰; A549细胞; 乏氧应答;

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