酵母3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的分离纯化及部分性质

梁智群; 莫柏立; 李湘萍; 粟桂娇; 庞宗文; 黄时海

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酵母3-脱氧葡糖醛酮代谢酶的分离纯化及部分性质

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3-脱氧葡糖醛酮 ( 3- deoxyglucosone)是美拉德反应的主要中间产物 ,对生物体具有毒性作用 .用硫酸铵分部沉淀、DEAE- cellulose52、Hydroxyapatite、DEAE- Sepharose CL- 6B柱层析从酿酒酵母 YBr-M( S.cerevisiae YBr-M)抽提液中分离纯化了 3-脱氧葡糖醛酮代谢酶 (以 NADPH为辅酶 ) .该酶是单一的分子 ,分子量为 44k D,反应最适 p H为 7.0 ,p H6.0～ 8.0之间酶活性相对稳定 ,以 3-脱氧葡糖醛酮为底物的米氏常数 Km 为 2 .2 5mmol/ L.在 35℃以下保温 30 min酶活不变 ,50℃保温 30 min后酶活损失 50 % .该酶对二羰基化合物的活性较高 ,对单羰基化合物则较低 ,其催化作用受碘乙酸、N-乙基顺丁烯二酰亚胺的抑制 ,而被β-巯基乙醇、二硫苏糖醇激活 ,催化作用必须以 NADPH为专一辅酶 ,当用 NADH代替 NADPH时 ,活力只有 5.3% .

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2000年第1期|106-109|共4页
作者
梁智群; 莫柏立; 李湘萍; 粟桂娇; 庞宗文; 黄时海;
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作者单位

广西大学食品与发酵工程研究所;

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正文语种 chi
中图分类酶;
关键词
美拉德反应; 3-DG代谢酶; 分离纯化; 酶学性质;

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