核受体PPARγ结合小肽的筛选及其功能

谢谆怡; 江渝; 叶治家; 彭家和; 何凤田; 曹廷兵

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核受体PPARγ结合小肽的筛选及其功能

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为筛选与核受体过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)结合的功能短肽,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达PPARγ配体结合域(LBD)的融合蛋白,并利用Ni2+-NTA离子交换树脂对表达蛋白进行纯化.以此纯化蛋白为靶,采用固体包被法对噬菌体展示随机十二肽库及环七肽库进行亲和筛选.经ELISA法鉴定特异结合的高亲和力阳性噬菌体单克隆并测序.同时利用PPARγ的配体rosiglitazone与噬菌体小肽进行竞争性结合抑制实验.最终获得与PPARγ-LBD高亲和力的十二肽3个,环七肽5个,分别含LXXLL和DXXRW(其中X为非特异氨基酸残基)保守序列.Rosiglitazone不影响噬菌体小肽与靶蛋白的结合,说明获得与配体rosiglitazone结合位点不同的目的肽.

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2005年第5期|661-664|共4页
作者
谢谆怡; 江渝; 叶治家; 彭家和; 何凤田; 曹廷兵;
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作者单位

第三军医大学生物化学与分子生物学教研室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物小分子的结构和功能;基因工程（遗传工程）;
关键词
过氧化物酶体增殖物激活受体γ; 噬菌体表面呈现; 亲和筛选;

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