用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP

王长松; 刘友生; 葛晓冬; 李红; 陈燕平

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用杆状病毒-昆虫细胞系统表达、纯化重组的人源化氨基末端LBP

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根据已有的资料显示LBP与LPS的结合位点位于其氨基末端的第 91～ 1 0 0个氨基酸残基。在体外构建含有人LBP与LPS结合活性部分的穿梭质粒pBacmidtLBP ,并且带上 6×his的标签 ,用此穿梭质粒转染sf2 1昆虫细胞 ,获得重组病毒。然后用重组病毒液感染对数生长期的sf2 1昆虫细胞 ,72h后收获含有这种截断型人源化氨基末端LBP (NH LBP)的培养上清。用金属亲和树脂纯化后 ,采用SDS PAGE电泳以及Western Blot鉴定所得到的纯化物。成功获得相对分子质量约为 30 0 0 0的NH LBP。为进一步研究LBP在介导LPS活化靶细胞中的作用机制奠定了基础。

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来源
《中国生物工程杂志》 |2004年第12期|69-73|共5页
作者
王长松; 刘友生; 葛晓冬; 李红; 陈燕平;
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作者单位

第三军医大学西南医院病理学研究所;

第三军医大学研究生管理大队三队;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;骨骼疾病;
关键词
LBP; 昆虫细胞; LPS; 人源化; 穿梭质粒; 纯化; 表达; 重组病毒; 生长期; 收获;

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