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Th17及Th1细胞在四氯化碳致肝纤维化小鼠模型中的表达及关系

         

摘要

目的:研究辅助性T细胞17(T helper cells 17,Th17)和Ⅰ型辅助性T细胞(typeⅠhelper T cells,Th1)及其相关因子白介素-17(interleukin-17,IL-17)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)在四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导肝纤维化小鼠模型中的表达及相互关系.方法:将50只♂Balb/c小鼠按随机数字表法分为5组:正常对照组(N)、4 wk对照组(C4)、8wk对照组(C8)、4 wk肝纤维化组(F4)、8 wk肝纤维化组(F8),每组10只.采用腹腔内注射CCl4以复制肝纤维化小鼠模型.HE和Masson染色观察小鼠肝脏病理改变;免疫组织化学染色检测肝脏组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达;流式细胞检测小鼠脾脏中CD4+IL-17+T(Th17)细胞、CD4+IFN-γ+T(Th1)细胞的比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血IL-17、IFN-γ的含量,并分析这些指标的相关性.结果:(1)肝组织病理切片HE染色和Masson染色显示,CCl4腹腔注射成功诱导小鼠肝纤维化模型;(2)α-SMA免疫组织化学显示:模型组α-SMA表达增加,在门静脉、汇管区及纤维间隔区域内可见α-SMA大量表达,且随肝纤维化程度加重而增加;(3)F4组和F8组小鼠脾脏Th17细胞、Th1细胞比例明显高于N组、C4组和C8组,且以F8组增高更为明显,差异均有统计学意义(均P<0.05);(4)F4组和F8组外周血IL-17、IFN-γ的含量较N组、C4组和C8组明显增高,差异均有统计学意义(均P<0.05);(5)模型组脾脏T h17细胞、T h1细胞与肝脏α-SMA含量密切正相关(均P<0.01),脾脏Th17细胞分别与Th1细胞、外周血IL-17水平密切正相关(均P<0.01).结论:CCl4致肝纤维化小鼠模型中脾脏Th17和Th1细胞及外周血IL-17、IFN-γ水平明显升高,Th17细胞通过分泌IL-17参与肝纤维化过程.

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