柠檬烯转化酶的提取条件优化及酶学性质研究

张莹莹; 李志; 张璐璐; 李晓; 范刚; 彭芷芊; 任婧楠; 潘思轶

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以指状青霉(Penicillium digitatum)DSM62840为研究对象,采用高压细胞破碎法破碎菌体,对其转化柠檬烯生成α-松油醇过程中的相关酶的提取条件进行优化。以柠檬烯转化酶活性为指标,在单因素试验的基础上结合响应面试验法,确定最佳提取条件;同时,对柠檬烯转化酶的酶学性质进行了初步探索。结果显示,最佳提取条件为:破碎压力100 MPa、破碎6次、液料比15∶1(mL/g),在此条件下,α-松油醇的质量浓度为855.75 mg/L,酶活力达到71.31 U。柠檬烯转化酶最佳转化时间为4 h,在磷酸盐缓冲液中获得的酶活性最高;该酶可能为细胞色素P450,且不同的金属离子对酶活性的影响不同:Fe^2+对酶有轻微的抑制作用,而Ca^2+、Mg^2+、Mn^2+、Zn^2+、Co^2+、Ba^2+、Na^+、K^+、Fe^3+、Ni^2+则对酶有不同程度的激活作用。粗酶液SDS-PAGE电泳结果表明优化后的提取工艺效果较好。

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来源
《华中农业大学学报》 |2020年第4期|105-113|共9页
作者
张莹莹; 李志; 张璐璐; 李晓; 范刚; 彭芷芊; 任婧楠; 潘思轶;
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作者单位

华中农业大学食品科学技术学院/环境食品学教育部重点实验室;

武汉430070;

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正文语种 chi
中图分类 TS201.25;
关键词
指状青霉; 柠檬烯; 提取条件; 生物转化; 柠檬烯转化酶; 响应面优化; 酶活性;

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