人源抗狂犬病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达

张世珍; 梁米芳; 董关木; 郑海法; 侯云德

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人源抗狂犬病毒单克隆抗体Fab段基因的获得和表达

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运用噬菌体表面呈现 (phagedisplay)技术获得了人源抗狂犬病毒糖蛋白基因工程单克隆抗体Fab段基因及其表达。从狂犬病毒PM株Vero细胞疫苗免疫的人抗凝血中分离获得外周淋巴细胞 ,提取细胞总RNA ,通过RT -PCR方法 ,用一组人IgGFab基因特异性引物 ,从合成的cDNA中扩增了一组轻链和重链Fab段基因 ,将轻链和重链先后克隆入噬菌体载体 pComb3,成功地建立了抗狂犬病毒噬菌体抗体库 ,并用纯化的狂犬病毒颗粒和几株抗狂犬病毒鼠单克隆抗体 (单抗 )捕捉狂犬病毒抗原的方法 ,对此抗体库进行富积筛选表达 ,成功地获得了抗狂犬病毒的人源单抗Fab段基因及其在大肠杆菌中的有效表达。对其中一株单抗G10进行了较为系统的分析 ,发现它与一株鼠源中和性狂犬病毒糖蛋白特异性单抗存在竞争 ,证实该单抗能识别狂犬病毒糖蛋白。其序列资料分析表明。

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来源
《病毒学报》 |2001年第1期|11-16|共6页
作者
张世珍; 梁米芳; 董关木; 郑海法; 侯云德;
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作者单位

中国预防医学科学院病毒学研究所病毒基因工程国家重点实验室;

中国药品生物制品检定所;

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正文语种 chi
中图分类其他病毒;
关键词
狂犬病毒; 噬菌体; 表面呈现; 人源基因工程抗体; Fab段; 单克隆抗体;

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