兔源内毒素结合蛋白的提取纯化及体外生物学活性研究

葛晓冬; 刘友生; 王晓东; 潘峰; 周萍

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兔源内毒素结合蛋白的提取纯化及体外生物学活性研究

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目的　从烧伤合并内毒素血症损伤兔的血清中分离纯化出内毒素结合蛋白 (Lipopolysaccharide BindingProteinLBP) ,以研究LBP在烧伤复合内毒素血症中的作用。方法　兔血清中蛋白质通过二步离子交换层析 (Bio Rex 70Resin、Mono Q)及凝胶过滤来分离纯化 ,并经流式细胞分析实验、绵羊红细胞凝聚实验、氨基末端氨基酸残基测序等方法鉴定 ,再将LBP作用于体外培养的人单核细胞 (U93 7) ,观测其分泌TNFα等细胞因子的状况。结果　获得一种分子量为 60× 10 3蛋白质 ,其N端 10个氨基酸序列为TNPGLITRIT ,与NCBI蛋白质库中有关兔的氨基酸序列进行比较 ,发现其与LBP的序列相同 ,它能促进脂多糖 (LipopolysaccharideLPS)与外周血单核细胞 (PBMC)结合 ,并能促进U93 7在极低浓度的LPS用下分泌TNFα。结论　从血清中分离纯化带有生物活性、全长LBP是可行的 ,LBP能促进极低浓度的LPS与单核细胞结合 ,介导炎性因子的分泌 ,从而促进炎症反应的发生。

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来源
《陆军军医大学学报》 |2003年第6期|514-518|共5页
作者
葛晓冬; 刘友生; 王晓东; 潘峰; 周萍;
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作者单位

第三军医大学附属西南医院病理学研究所;

第三军医大学高原军事医学系中心实验室;

第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所分子生物学中心;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类免疫分子生物学（免疫化学）;生物化学检验、临床检验;
关键词
内毒素结合蛋白; 脂多糖; 二步离子交换层析; 凝胶过滤; 肿瘤坏死因子α;

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