阴沟肠杆菌(nifL- A^c) 工程菌株的构建

邱德义; 沈炳福

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采用基因定位突变的方法，在体外把来自ｐＢＲ３２２的四环素抗性（Ｔｃｒ）基因片段插入由ｐＳＴ１１４２质粒所携带的阴沟肠杆菌ｎｉｆＬ基因３’端的Ｓｍａ Ⅰ位点，再经细胞体内同源基因片段的重组交换，选择获得了在染色体上ｎｉｆＬ突变的阴沟肠杆菌Ｅ１２和Ｅ１３，两者Ｔｃｒ基因插入ｎｉｆＬ的转录方向相反。经分析显示，Ｅ１３（ｎｉｆＬ－）由于Ｔｃｒ基因插入后，在ｎｉｆＡ上游产生具有启动子功能的核苷酸序列（ＴＴＴＣＡＴＡ），激活ｎｉｆＡ的表达。当Ｅ１３和Ｅ１２被引入多拷贝组成型ｎｉｆＡ质粒ｐＢＦ１０１后，在有氨条件下ｎｉｆ基因去阻遏表达，呈高的固氮酶活力，与野生型Ｅ２６（ｐＢＦ１０１）比较，其比活力提高近１

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来源
《植物生理与分子生物学学报》 |1999年第3期|269-273|共5页
作者
邱德义; 沈炳福;
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作者单位

中国科学院上海植物生理研究所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类基因工程（遗传工程）;生物固氮、游离氮的同化作用;
关键词
基因表达; nifL; nifA; 阴沟肠杆菌; 工程菌株;

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