猪生殖与呼吸综合征病毒非结构蛋白nsp4基因的表达及其产物的纯化

胡涛; 才学鹏

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根据GenBank中已登录的猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)全基因组序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV非结构蛋白nsp4基因进行了RT-PCR扩增,将回收的目的基因片段克隆到大肠埃希氏菌表达载体pET28a中,构建了重组质粒pET-nsp4,测序结果证实了重组质粒pET-nsp4的可靠性。将pET-nsp4转化至大肠埃希氏菌表达菌株BL21(DE3),用IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果表明,重组菌可表达分子质量约23 ku的蛋白。经镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化,获得了高纯度的重组蛋白,Western-blot分析结果表明,nsp4重组蛋白在大肠埃希氏菌系统中获得了正确表达。

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来源
《中国兽医科学》 |2006年第9期|687-691|共5页
作者
胡涛; 才学鹏;
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作者单位

中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类猪;
关键词
猪生殖与呼吸综合征病毒; nsp4基因; 表达; 纯化;

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