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柱前衍生-HPLC荧光法测定人血清中的饱和与不饱和脂肪酸

         

摘要

[目的]建立人血清中饱和及多不饱和脂肪酸高效液相色谱分离及测定方法。[方法]3-溴甲基-6,7-二甲氧基-1-甲基-2(1H)喹喔啉酮(Br-DMEQ)作荧光标记试剂,74%乙腈-水溶液作流动相,岛津shim-pack CLC-C8(150mm×6.0mmΦ)为色谱柱,HPLC柱前衍生化分离测定脂肪酸。[结果]得到该衍生化试剂与脂肪酸的衍生化反应条件及脂肪酸生成的酯衍生物的荧光光谱,衍生物荧光强度衰减情况、最佳色谱分离条件及C12:0-C22:6的11种脂肪酸的分离图谱。2.0ng/ml~8.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,回收率在91%~105%;本方法最低检测限0.2pg/ml,首次在国内报道了以该法测定人血清中C18:3,C20:4,C20:5,C22:6脂肪酸的结果。[结论]方法重现性好,灵敏度高,快速、简便,准确可靠,是一种可用于常规检测脂肪酸的荧光-HPLC法。

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