肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)cDNA的克隆、表达和活性测定

侯登勇; 颜真; 韩苇; 赵宁; 张英起

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肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)能选择性诱导肿瘤细胞凋亡 .为利用基因工程技术获得重组TRAIL蛋白可溶性片段 (sTRAIL) ,设计 1对引物 .利用PCR技术特异性扩增出sTRAIL的cDNA ,克隆于质粒pGEM 3Zf( )的EcoRⅠ和PstⅠ位点 .经测序证明序列正确后克隆于表达质粒pBV2 2 0的EcoRⅠ和PstⅠ位点 ,转化大肠杆菌DH5α .转化菌株经温度诱导 ,SDS PAGE检测和Western印迹鉴定 ,获得重组sTRAIL的高水平非融合表达菌株 .表达量占菌体总蛋白的 2 0 % .对其表达产物进行了初步纯化 ,SDS PAGE结果显示纯度可达 90 %以上 .用L92 9细胞测定其生物学活性表明。

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来源
《中国生物化学与分子生物学报》 |2002年第1期|27-31|共5页
作者
侯登勇; 颜真; 韩苇; 赵宁; 张英起;
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作者单位

第四军医大学生物技术中心;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类医学遗传工程;细胞的衰老与死亡;
关键词
TRAIL; 克隆; 表达; 诱导凋亡配体; TNF; 肿瘤坏死因子; 活性测定;

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