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一种快速有效的丙型肝炎病毒cDNA克隆的筛选和鉴定方法

         

摘要

在丙型肝炎病毒(HCV)eDNA克隆的过程中,将eDNA的PCR产物克隆入载体pGEM-3Zf的SmaI酶切位点,使用PCR法标记的Digoxigenin cDNA探针,通过原位杂交筛选特异的重组体。实验证明用此法进行cDNA克隆具有高度的特异性和实用价值,尤其适用于cDNA PCR产物量小的情况。改进的方法比其它方法更为快速、简便。应用该法,我们成功地克隆并表达了HCV基因组的两个区(C和NS3基因)。

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