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水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路对MPP+诱导帕金森病体外模型细胞损伤的影响

         

摘要

目的:探讨水木和宁方通过调控泛素-蛋白酶体通路(UPP)对帕金森病细胞模型的影响。方法:通过MPP+诱导帕金森病体外细胞模型,利用MTT法检测细胞活性,筛选美多芭、水木和宁方药物干预最佳浓度。药物干预后,采用Real-time PCR法和Western blotting法分别检测与UPP相关的泛素(UB)、泛素激活酶E1(UBE1)、Parkin、泛素羧基端水解酶-L1(UCH-L1)、α-突触核蛋白(α-syn)、酪氨酸羟化酶(TH)的mRNA和蛋白表达水平。结果:MTT法筛选MPP+最佳造模浓度为1mmol/L,水木和宁方、美多芭药物最佳浓度分别为6 mg/mL和3.125μg/mL。镜下观察显示水木和宁方、美多芭对MPP+诱导的PC12细胞具有保护作用,可以提高细胞存活率。Real-time PCR法和Western blotting结果表明,与对照组比较,模型组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05);与模型组比较,水木和宁方组、美多芭组PC12细胞TH、UB、UBE1、Parkin、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达均明显下调(P<0.05);与美多芭组比较,水木和宁方组PC12细胞TH、UB、UCH-L1的mRNA和蛋白表达均明显上调(P<0.05),α-syn的mRNA和蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论:水木和宁方可能通过调控UPP功能促进异常蛋白降解,减少神经元凋亡,从而发挥抗帕金森病的作用。

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