旨在构建一个适用于农杆菌的遗传转化载体,为研究农杆菌T-复合物招募蛋白VBP3的编码基因Atu4856的表达调控机制奠定基础。通过聚合酶链式反应(PCR)获得该编码基因5'端上游可能含有转录活性的DNA片段。用绿色荧光蛋白基因(gfp)和495 bp Atu 4856启动子构成嵌合基因,以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,体外构建启动子探针prset-agfp1,转化大肠杆菌,通过抗生素筛选和对绿色荧光蛋白(GFP)的跟踪观察,最终确定有启动子转录活性的基因片段。结果表明,该载体适用于农杆菌T-复合物招募蛋白VBP3的编码基因Atu4856的表达调控机理的研究。
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