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11份蜜环菌种质rDNA-IGS序列分析及液体培养基优化

         
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为比较蜜环菌rDNA-IGS序列差异,筛选液体培养优势菌株及优化其培养基,采用引物5SA/CNL12进行rDNA-IGS扩增及测序,利用DNAMAN构建同源树并分析其序列特征。在相同的液体培养条件下培养11份蜜环菌种质,通过比较菌球的个数、直径、鲜(干)重以及折干率等指标,筛选出优良蜜环菌菌株,并采用正交试验对其液体培养基进行优化。结果表明:11份蜜环菌种质可分为两类,Ⅰ类包括M-01—M-05,M-08—M-10,Ⅱ类包括M-06、M-07、M-11;Ⅰ类中有7个位点存在变异,共有序列长度为861 bp,Ⅱ类中有17个位点存在变异,共有序列长度为804 bp,且嘌呤(A+G)均大于嘧啶(T+C)。两类蜜环菌种质的相似度为72.61%,共有序列长度为632 bp,其中碱基A、C、G、T所占比例分别为33.9%、24.8%、16.6%、24.7%。M-09液体培养表现较优,优化培养基为玉米淀粉8.0 g/L,黄豆粉8.0 g/L,葡萄糖20.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,酵母浸膏2.0 g/L,磷酸二氢钾2.5 g/L,七水硫酸镁0.5 g/L,维生素B11.0 g/L。以此培养基培养蜜环菌,最终菌球收率可达1.766 g/150 mL。

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