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桉树AFLP标记反应体系的建立

         

摘要

In order to get stability molecular markers for Eucalyptus germplasm and molecular -marker assist-ed breeding ,24 Eucalyptus clones commonly used in plantations were selected as the test materials for genom-ic DNA extraction . By optimizing each reaction procedure , an AFLP reaction system was established . This system included 100 ng high purity genome DNA and no less than 0 .5 U EcoR I and Mse I respectively , 4~14 hour enzyme digestion and DNA reunion , 5 times diluted pre -amplification products for selective amplifica-tion . The fragments were 50 bp to 700 bp in the pre -amplification products . Lastly , the best temperature℃%  为获得桉树种质鉴定、辅助育种所需稳定的分子标记,本研究以生产中常用的24个桉树无性系基因组DNA为材料,对AFLP的反应体系和参数进行优化,发现高纯度的模板最低用量为100 ng ;EcoR Ⅰ、Mse Ⅰ用量不低于0.5 U ;酶切连接时间需要大于4 h ,但不多于14 h。预扩增获得50~700 bp产物;该产物稀释5倍后用于选择性扩增。聚丙烯酰胺胶电泳检测温度以20℃为佳。

著录项

  • 来源
    《桉树科技》 |2013年第1期|20-24|共5页
  • 作者单位

    广西林业科学研究院;

    国家林业局中南速生材繁育实验室;

    广西优良用材林资源培育重点实验室;

    广西 南宁530002;

    广西林业科学研究院;

    国家林业局中南速生材繁育实验室;

    广西优良用材林资源培育重点实验室;

    广西 南宁530002;

    广西林业科学研究院;

    国家林业局中南速生材繁育实验室;

    广西优良用材林资源培育重点实验室;

    广西 南宁530002;

    广西林业科学研究院;

    国家林业局中南速生材繁育实验室;

    广西优良用材林资源培育重点实验室;

    广西 南宁530002;

    广西林业科学研究院;

    国家林业局中南速生材繁育实验室;

    广西优良用材林资源培育重点实验室;

    广西 南宁530002;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 桉;
  • 关键词

    桉树; AFLP; 体系优化;

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