表面展示南极假丝酵母脂肪酶B的重组毕赤酵母高密度发酵条件优化

冯琮; 林影; 梁书利; 苏国栋; 韩双艳

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以Invitrogen公司提供的毕赤酵母发酵工艺手册为依据,先用摇瓶模拟甘油分批发酵,确定了表面展示南极假丝酵母脂肪酶B(Candida antarctie lipase B,CALB)的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需几种重要配方的最佳浓度为:甘油含量40 g/L、硫酸铵4 g/L、PTM14 mL/L和CaSO4 10 mmol/L;然后利用多功能补料摇床确定了菌株最适生长和产酶的pH分别为5.5和7.0,最适生长和产酶温度为30℃;再在2L发酵罐上放大,并对甘油流加模式和甲醇流加模式进行了优化筛选,确定了以9.6 mL/(L·h)的流速流加甘油12h能有效提高菌体密度;以6.4 mL/(L·h)的流速恒速流加甲醇比恒定溶氧流加甲醇诱导产酶更佳.最终单位菌体酶活力可达348.4 U/g,比甘油含量40 g/L、硫酸铵10 g/L、PTM14.35 mL/L、CaSO4 0.93 g/L,以6.4 mL/(L·h)的流速流加甘油4h和以恒定溶氧流加甲酵的未优化条件下提高34.8%.最后通过细胞表面荧光强度检测和全细胞催化合成活力对比,发现优化后单位菌体展示的蛋白表达量得到提高.

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来源
《食品与发酵工业》 |2010年第9期|29-34|共6页
作者
冯琮; 林影; 梁书利; 苏国栋; 韩双艳;
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作者单位

华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室;

广东;

广州;

510006;

华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室;

广东;

广州;

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华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室;

广东;

广州;

510006;

华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室;

广东;

广州;

510006;

华南理工大学生物科学与工程学院广东省发酵与酶工程重点实验室;

广东;

广州;

510006;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
发酵优化; 酵母表面展示; 南极假丝酵母脂肪酶B; 高密度;

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