脱氧雪腐镰刀菌烯醇模拟表位的2种融合蛋白的表达及其在无毒酶联免疫吸附方法中的应用

徐富勇; 孟玮; 刘仁荣; 徐玲; 裘雪梅; 朱立鑫

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脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)的模拟表位(CDON),是从噬菌体展示随机肽库中淘选出来的七肽,可模拟DON与抗DON抗体结合.为了在酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)中用重组蛋白替代DON偶联物,以期开发出能代替偶联DON人工抗原的无毒检测DON的ELISA方法,通过构建重组表达载体pGEX-CDON和pC89S4-CDON,并在大肠杆菌表达系统中分别表达和纯化GST-CDON和pⅧ-CDON融合蛋白,比较测定2种融合蛋白与抗DON抗体的结合效果.ELISA方阵滴定结果显示:纯化的融合蛋白具有良好的反应原性.在间接竞争性ELISA中,当以融合蛋白GST-CDON为包被抗原时,检测限为31 ng/mL,线性范围为31～500 ng/mL,IC50为194 ng/mL,加标回收率为54.1％～65.4％,变异系数为6.28％～13.37％;当以融合蛋白pⅧ-CDON为包被抗原时,检测限为15 ng/mL,线性范围为15～500 ng/mL,IC50为94 ng/mL,加标回收率为81.7％～89.0％,变异系数为3.15％～7.55％.

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来源
《食品科学》 |2014年第8期|198-203|共6页
作者
徐富勇; 孟玮; 刘仁荣; 徐玲; 裘雪梅; 朱立鑫;
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作者单位

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

南昌大学生命科学与食品工程学院;

江西南昌 330029;

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

江西科技师范大学生命科学学院;

江西南昌 330013;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类生物工程应用;
关键词
脱氧雪腐镰刀菌烯醇; 模拟表位; 质粒; 噬菌粒;

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