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三重real-time PCR同步检测黄牛、水牛和牦牛成分

         
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摘要

为准确快速地鉴定黄牛、水牛和牦牛的成分,研发具有这3种牛特异性的引物和探针,并建立单重、双重和三重实时聚合酶链式反应(real-time polymerase chain reaction,real-time PCR)方法,同步检测上述3种牛的成分.单重real-time PCR检测时,3种牛的检测灵敏度均为0.025 ng/μL;双重real-time PCR检测时,两两组合的引物探针含量比例为1∶1时,黄牛的检测灵敏度降低至0.1 ng/μL,而水牛和牦牛仍为0.025 ng/μL;对三重real-time PCR检测体系进行优化,当黄牛、水牛和牦牛3组引物探针的含量比例为3∶3∶2时,检测灵敏度最佳,黄牛和水牛的检测灵敏度可达到0.1 ng/μL,而牦牛的灵敏度仍可达到0.025 ng/μL.但上述双重和三重real-time PCR检测的灵敏度,是建立在3种牛的含量比例为1∶1∶1的情况下,若3种牛的比例差异较大,特别是黄牛和牦牛的含量比例差异较大时,如比例为9∶1时,含量低的成分会存在漏检.因此,在对整块肉的样品进行检测时,可采用三重real-timePCR的方法同步检测3种牛的成分;若样品可能为上述3种肉的为混合物,如肉糜、肉松等,则建议采用单重real-timePCR检测.

著录项

  • 来源
    《食品科学》 |2021年第20期|280-285|共6页
  • 作者

    吴姗; 张晓峰; 张明哲; 方云; 陈哲; 张荃; 孙超; 沈旭芳; 虞惠贞; 尹文秀;

  • 作者单位

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

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    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

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    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

    浙江省检验检疫科学技术研究院 浙江杭州 310016;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 生物工程学（生物技术）;
  • 关键词

    黄牛; 水牛; 牦牛; 三重real-time PCR;

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