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厚颌鲂幼鱼肠上皮细胞刷状缘膜囊的提取

         

摘要

根据沉淀方法和离心速度的不同分为4个试验组提取厚颌鲂(Megalobrama pellegrini)70日龄幼鱼的肠上皮细胞刷状缘膜囊(BBMV).四个试验组如下:A组-钙离子沉淀法,28 000 g离心;B组-钙离子沉淀法,43000 g离心;C组-PEG沉淀法,28 000 g离心;D组-PEG沉淀法,43 000 g离心.采用细胞器和细胞膜指示酶的富集系数、核糖核酸和脱氧核糖核酸含量来评价各试验组提取BBMV的纯度.结果表明:肠上皮细胞刷状缘膜囊提取后,DNA的富集系数各组排列为D<B<C<A,D组的富集系数为0;RNA的富集系数排列为D<B<C<A,D组的富集系数为0.007;各组的蔗糖酶、γ谷氨酰转移酶(γ-GT)及碱性磷酸酶(AKP)富集系数排列为A<C<B<D,D组各酶的富集系数分别为:6.172、12.700、20.185.麦芽糖酶的富集系数排列为A<C<D<B,B组的富集系数为5.789;而Na+-K+-ATP酶和琥珀酸脱氢酶(SDH)在采用43 000 g离心后均为0.上述结果说明采用PEG沉淀法、43 000 g离心试验组提取的BBMV的纯度优于其余各试验组.

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