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水稻泛素连接酶基因OsHUB2实时荧光定量PCR方法的建立

         
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摘要

在已获得水稻泛素连接酶基因Os H UB2过表达转基因植株的基础上，根据 Os H UB2基因序列设计3对引物，分别为 OsHUB2-1、OsHUB2-2、OsHUB2-3，通过 RT-PCR筛选条带特异单一的引物， real time PCR （qRT-PCR）方法验证最适合检测OsHUB2的反应条件。结果表明OsHUB2-F3R3扩增的PCR产物特异性最强，扩增曲线及熔解曲线等指标都在理想范围内，同时该引物能很好地区分对照及转基因材料，进而筛选出Os H UB2基因上调表达的转基因植株。Realtime体系的建立与优化为今后进一步研究水稻泛素连接酶基因Os H UB2的功能奠定了基础。%(1 .RiceResearch Institute ,FujianAcademy of Agricultural Sciences ,Fuzhou,Fujian 350019 ,China;2 . Key Laboratory of Germplasm Innovation and Molecular Breeding of Hybrid Rice for South China ,Ministry of Agriculture ,P.R China/Fuzhou branch ,National Rice Improvement Center of China/Fujian Engineering Laboratory of Crop Molecular Breeding/ Fujian Key Laboratory of Rice Molecular Breeding ,Fuzhou , Fujian 350003 ,China;3 . Incubator of National Key Laboratory of Fujian Germplasm Innovation and Molecular Breeding between Fujian and Ministry of Sciences & Technology ,P.R.China , Fuzhou ,Fujian 350003 ,China;4 . National Rice Engineering Laboratory of China ,Fuzhou , Fujian 350003 ,China;5 . South China Bases of National Key Laboratory of Hybrid Rice for China ,Fuzhou ,Fujian 350003 ,China;6.Fruit Research Institute ,Fujian Academy of Agricultural Sciences ,Fuzhou ,Fujian 350013 ,China)and OsHUB2-F3R3 ,were designed using the Primer Premier 5.0 according to the sequence of the enzyme from GeneBank .Subsequently ,RT-PCR was conducted to select the best primer pairs with a specific and single amplification product . The results showed OsHUB2-F3R3 to be desirable on both and functions . The analytical procedure was thus considered of use in future studies on the rice ubiquitin ligase .

著录项

  • 来源
    《福建农业学报》 |2014年第7期|641-645|共5页
  • 作者

    何炜; 朱永生; 连玲; 周平; 蔡秋华; 王颖姮; 谢鸿光; 张建福; 谢华安;

  • 作者单位

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院果树研究所;

    福建 福州 350013;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

    福建省农业科学院水稻研究所;

    福建 福州 350019;

    农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州国家水稻改良分中心/福建省作物分子育种工程实验室/福建省水稻分子育种重点实验室;

    福建 福州 350003;

    福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地;

    福建 福州 350003;

    水稻国家工程实验室;

    福建 福州 350003;

    杂交水稻国家重点实验室华南基地;

    福建 福州 350003;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 稻;
  • 关键词

    水稻; 泛素连接酶基因; 荧光定量PCR;

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