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健脾祛湿方调控LncRNA H19/miR-130a-3p对高脂血症大鼠血脂代谢及胆固醇逆转运的研究

         
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目的观察健脾祛湿方对高脂血症大鼠的降血脂作用,探究其作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组和模型组,采用高脂饲料喂养建立高脂血症大鼠模型。造模2周后,根据总胆固醇(total cholesterol,TC)水平将模型组随机分成5组:功能模型组、血脂康组、健脾祛湿方低、中、高剂量组。正式分组后给药,灌胃剂量为1 mL/100 g,除空白组、功能模型组给予生理盐水外,其余各组给予相应的药物,连续给药6周。测定血脂四项:TC、甘油三酯(triglycerides,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、动脉粥样硬化指数(atherosclerotic index,AI)、冠心指数(coronary heart index,R-CHR);肝肾功能:谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、血尿素(blood urea,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol acyltransferase,LCAT)、胆固醇酯转运蛋白(cholesteryl ester transporter,CETP);采用油红O染色法观察主动脉、肝脏脂质沉积情况;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)、肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)、三磷酸腺苷结合盒转运体A1(adenosine triphosphate binding cassette transporter A1,ABCA1)蛋白表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏长链非编码RNA(long non-coding RNAs,LncRNAs)H19、miR-130a-3p、PPARγ、LXRα、ABCA1 mRNA表达。结果与正常组比较,功能模型组大鼠体质量显著升高(P<0.01),血清TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,AI、R-CHR水平显著升高(P<0.01),主动脉、肝脏可见脂质沉积;血清AST、ALT、Scr活性升高,BUN水平降低;CETP含量显著升高,LCAT含量显著降低(P<0.01);肝脏PPARγ、LXRɑ、ABCA1蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05),LncRNA H19、miR-130a-3p mRNA水平显著升高(P<0.01,P<0.05);与功能模型组比较,各给药组大鼠体质量呈下降趋势,血清TC、TG、LDL-C水平下降,HDL-C水平明显升高,AI、R-CHR水平显著降低,主动脉、肝脏脂滴含量明显减少,血清AST、ALT、Scr降低;CETP酶活性显著降低,LCAT酶活性显著升高;肝脏LncRNA H19、miR-130a-3p mRNA水平显著降低,PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白及mRNA表达增强。结论健脾祛湿方可改善高脂血症大鼠脂代谢紊乱情况,调节血脂水平,其作用机制可能通过调控LncRNA H19正向靶向miR-130a-3p表达调节PPARγ介导的胆固醇逆转运过程实现的。

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