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基于对衰老大鼠心脏抗氧化保护作用及Keap1-Nrf2-HO-1通路探讨川芎临床“久服”用药策略

         
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目的通过构建衰老合并血瘀大鼠模型,基于抗氧化通路探讨川芎小剂量下久服对于延缓衰老的药效及作用机制,从而探讨川芎的临床用药策略。方法SD大鼠66只,分为空白组、模型组、维生素E组、川芎2 g组、川芎4 g组、川芎配伍人参2 g组;除空白组外各组腹腔注射D-半乳糖(300 mg/kg)连续42天,同时继续造模并给药14天,第15天冰水浴20分钟,连续14天,最后一天注射0.1%肾上腺素0.8 mg/kg。WST-1法检测血清及心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶活性(glutathione peroxidase,GSH-PX)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC),TBA法脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA),ELISA检测蛋白质羰基化合物(protein carbonyl,PC)含量,检测心脏组织Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量。蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定检测心脏组织核因子E2相关因子2(nuclearfactor erythroidderived 2-like 2,Nrf2)蛋白、血红素加氧酶1(heme oxygenase 1,HO-1)蛋白、Kelch样ECH相关蛋白1(recombinant kelch like ECH associated protein 1,Keap1)表达量。结果与空白组相比,模型组体质量下降(P<0.05),血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量降低(P<0.01),MDA、PC含量升高(P<0.01),心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量降低(P<0.01),Nrf2、HO-1表达量降低(P<0.05);与模型组相比,维生素E组能升高大鼠体质量、血清及心脏组织SOD、GSH-PX、T-AOC含量,降低MDA、PC含量,升高心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶(P<0.05);川芎2 g、4 g升高血清GSH-PX、T-AOC含量,且川芎4 g提高心脏GSH-PX,降低血清及心脏MDA含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.05),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。川芎配伍人参配伍后进一步升高血清及心脏SOD、GSH-PX含量,降低血清MDA、PC含量,增加心脏组织中Na^(+)-K^(+)-ATP酶、Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATP酶含量(P<0.01),增加Nrf2、HO-1蛋白表达量(P<0.05)。结论对衰老合并血瘀大鼠模型,川芎小剂量久服即可发挥抗氧化作用;川芎与人参合用后川芎剂量减少可以起到协同增效作用,可通过Keap1-Nrf2-HO-1抗氧化通路对心脏起到保护作用。

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