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粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因转化子生物学特性及高效工程菌株的筛选

         

摘要

通过原生质体转化法,制备粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因的转化子,通过潮霉素抗性平板初筛及PCR复筛,共获得530个转化子.对其生物学性状测定表明,3株转化子产孢量明显增加,3株转化子生长量显著提高.比色法测定发现40%的转化子几丁质酶活高于野生型菌株,对峙试验发现25%的转化子抑菌效果明显提高.初步筛选出生长快速、产孢量多、几丁质酶高、对菌核抑制效果明显的转化菌株TC-8 、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,对其进行抗大豆菌核病防效试验测定,结果表明TC-8、TC-64 、TC-298转化子防病效果明显优于67-1原始菌株和化学农药,通过实时荧光定量PCR验证,发现此3株工程菌株几丁质酶表达量明显增加.

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