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microRNA-24对自噬的调节及血管内皮细胞管腔形成的影响

         
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摘要

目的 探讨microRNA-24(miR-24)对自噬相关基因LC3Ⅱ和Beclin-1的调节及其对血管内皮细胞管腔形成能力的影响.方法 将人脐静脉内皮细胞(HUVECs)随机分为空白对照组、雷帕霉素+miR-24高表达组以及雷帕霉素组.其中空白对照组的细胞不作任何处理;雷帕霉素+miR-24高表达组的细胞先转染miR-24高表达质粒,再用1000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;雷帕霉素组的细胞同样用1000 nmol/L的雷帕霉素干预6 h建立自噬模型;然后分别用MTT法检测HUVECs的增殖能力、细胞划痕实验检测HUVECs迁移能力及Matrigel实验检测HUVECs管腔形成能力,进一步用蛋白免疫印迹法(Western blot)和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测LC3II和Beclin-1的蛋白和mRNA表达水平.结果 (1)与空白对照组相比,雷帕霉素组、雷帕霉素+miR-24高表达组细胞增殖能力和迁移比例降低(P<0.05),雷帕霉素组的管腔形成数量、长度与空白对照组相近,而雷帕霉素+miR-24高表达组则基本没有形成明显管腔样结构.(2)与空白对照组相比,雷帕霉素+miR-24高表达组和雷帕霉素组的LC3II和Be-clin-1 mRNA和蛋白表达量均不同程度增加(P<0.05).(3)在雷帕霉素+miR-24高表达组中,上述指标较雷帕霉素组均降低(P<0.05),特别是管腔形成数目明显减少.结论 miR-24可在转录后水平调控自噬相关基因LC3II和Beclin-1的表达,进而下调细胞自噬水平.这很有可能是miR-24抑制HUVECs增殖、迁移和管腔形成的机制之一.

著录项

  • 来源
    《广东医学》 |2018年第15期|2268-2273|共6页
  • 作者

    杨鹏; 欧和生; 莫国君; 罗雪兰; 沈凤; 陶晓静; 吕冬宁;

  • 作者单位

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

    广西医科大学药学院 广西南宁530021;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    miR-24; 管腔; 自噬; LC3II; Beclin-1;

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