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卡巴胆碱对脓毒症大鼠肠道上皮细胞通透性和紧密连接的作用

         
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目的：探讨卡巴胆碱对脓毒症大鼠肠道上皮细胞通透性和紧密连接的作用。方法取健康成年雄性 SD 大鼠，随机分为4组（每组8只），经腹腔注射10 mg／kg 脂多糖（LPS）复制脓毒症模型：对照组：腹腔注射等体积的生理盐水；脓毒症组：腹腔注射10 mg／kg LPS；卡巴胆碱组：腹腔注射10 mg／kg LPS，15 min 后腹腔注射0．1 mg／kg 卡巴胆碱；α－BGT 组：腹腔注射10 mg／kg LPS，5 min 后皮下注射1．0μg／kg α－BGT，10 min 后腹腔注射0．1 mg／kg 卡巴胆碱。给予 LPS 3 h 后放血处死动物，取回肠组织，光镜下观察肠道上皮组织损害，荧光分光光度计测量体外漏出的 FITC －Dextran，统计肠系膜淋巴结、肝、脾中细菌移位数量，电镜下观察肠道上皮细胞紧密连接超微结构变化，共聚焦显微镜下观察肠道上皮细胞紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白移位，Western blot 法检测紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白含量。结果给予 LPS 后3 h，各组大鼠肠黏膜上皮细胞严重损伤，微绒毛坏死、脱落，炎性细胞浸润伴出血，肠黏膜组织学评分显著升高（P ＜0．05），肠道上皮组织通透性显著升高（P ＜0．05），肠系膜淋巴结、肝、脾中的菌落数明显增加（P ＜0．05），肠道上皮细胞紧密连接结构破坏，为低密度电子致密影，肠道上皮细胞紧密连接 ZO －1和 claudin －2蛋白结构缺失，细胞周围着色减少，大量移位。腹腔注射卡巴胆碱后可显著减轻脓毒症大鼠上述改变，皮下注射α－BGT 后可逆转卡巴胆碱的上述作用。结论卡巴胆碱可减轻脓毒症大鼠肠道上皮细胞损伤，降低其通透性，改善上皮细胞紧密连接蛋白移位和表达，该作用是通过激活胆碱能抗炎通路完成的。

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