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常见腹泻病毒的多重荧光RT-PCR检测方法的建立及临床应用

         
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目的 建立能同时检测病毒性腹泻患者粪便中星状病毒(astrovirus)、A族轮状病毒(group A rotavirus)、肠道腺病毒(enteric adenovirus)、诺如病毒 GⅠ/GⅡ(norovirus GⅠ/GⅡ)的多重荧光RT-PCR方法.方法 根据各病毒基因组保守性序列设计引物和探针,建立多重荧光RT-PCR检测方法.对建立的多重荧光RT-PCR方法 进行特异性、敏感性及灵敏性实验,并使用该法对256份病毒性腹泻粪便标本进行检测,同时使用基因测序进行验证.结果 成功建立常见腹泻病毒的多重荧光RT-PCR检测方法,对星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒以外的病原体不发生扩增反应.该法检测星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒、诺如病毒的灵敏度可达500 copies/mL.256份标本中:星状病毒、轮状病毒、肠道腺病毒和诺如病毒阳性率分别为3.12%(8/256)、42.97%(110/256)、9.38%(24/256)和10.16%(26/256),与基因测序方法 检测结果 符合率达到100%.结论 该多重荧光RT-PCR检测方法 具有快速、灵敏、特异的优点,可用于临床病原诊断.

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