荧光定量PCR法检测小鼠肠道中产气荚膜梭菌的实验研究

徐少珊; 孙朝晖; 陈荣誉; 杨永泉; 唐玲玲; 石玉玲

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荧光定量PCR法检测小鼠肠道中产气荚膜梭菌的实验研究

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目的建立一系列浓度梯度的A型产气荚膜梭菌(clostridium perfringens,C.perfringens)感染小鼠肠道的动物模型,探讨实时荧光定量PCR法对肠道中C.perfringens的检测.方法小鼠随机分成6组,每组10只,依次腹腔注射浓度为5.7×109、5.7×108、5.7×107、5.7×106和5.7×105 cfu/mL的A型C.perfringens菌液1 mL,空白对照组腹腔注射生理盐水1 mL.连续观察72 h,统计小鼠死亡数量、存活时间及腹腔取样做细菌革兰染色涂片镜检、细菌厌氧血平板厌氧培养、测序鉴定和荧光定量PCR定量检测.结果细菌镜检结果为5.7×109、5.7×108 和5.7×107 cfu/mL浓度组在显微镜下能观察到两头钝圆棒状的革兰阳性杆菌,细菌厌氧培养能培养出大量边缘粗糙的菌落;在5.7×106、5.7×105 cfu/mL浓度组和空白对照组不能发现革兰阳性杆菌,利用细菌培养法,5.7×106 cfu/mL组平均能培养出7个菌落,在5.7×105 cfu/mL组和空白对照组不能培养出任何菌落,克隆目的片段测序结果与GeneBank中C.perfringens16S rRNA[AB566417]完全一致.荧光定量PCR法在各浓度组为阳性,空白对照组为阴性.结论荧光定量PCR法在检测C.perfringens具有灵敏度高、特异性好、检验时间短的优点.

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来源
《广东医学》 |2011年第13期|1657-1660|共4页
作者
徐少珊; 孙朝晖; 陈荣誉; 杨永泉; 唐玲玲; 石玉玲;
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作者单位

南方医科大学研究生学院,广州,510515;

广州军区广州总医院检验科,广州,510010;

南方医科大学研究生学院,广州,510515;

广州军区广州总医院检验科,广州,510010;

广州军区广州总医院检验科,广州,510010;

广州军区广州总医院检验科,广州,510010;

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正文语种 chi
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关键词
A型产气荚膜梭菌; 荧光定量PCR法; 肠道坏疽;

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