凋亡素原核表达载体的构建和表达

朱惠明; 杨俊文; 蔡筱彦; 李银鹏; 顾红祥; 黄勋

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目的构建凋亡素原核表达系统,以制备抗原物质凋亡素融合蛋白.方法通过PCR方法,以pcDNA-VP3质粒为模板,扩增出凋亡素VP3基因.将其克隆到原核表达载体pET-DsbA的多克隆位点,构建成凋亡素的高效原核表达载体pET-DsbA-VP3,将该质粒转化到大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS中,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside,IPTG)对其进行诱导表达,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析目的蛋白.结果转化有凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3的大肠杆菌E.coliBL21(DE3)plysS经IPTG诱导后,聚丙烯酰胺凝胶电泳出现 38300 的目的蛋白条带.结论凋亡素原核表达载体pET-DsbA-VP3能高效表达出凋亡素融合蛋白.

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来源
《广东医学》 |2003年第10期|1058-1060|共3页
作者
朱惠明; 杨俊文; 蔡筱彦; 李银鹏; 顾红祥; 黄勋;
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作者单位

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

暨南大学附属第二医院,广东省深圳市人民医院消化内科,518020;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类消化系及腹部疾病;
关键词
凋亡素; 原核表达载体; 融合蛋白;

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