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红花注射液中蛋白类成分的分离、纯化与细胞致敏性评价

         

摘要

目的对红花注射液中蛋白类成分进行分离、纯化和致敏性研究。方法采用DEAE-52阴离子交换树脂对红花注射液中蛋白成分进行洗脱,初步探究洗脱成分的致敏性。然后采用Sephadex G-100大孔树脂对含有潜在致敏蛋白成分的洗脱液进行分离纯化,获取潜在致敏纯化蛋白。最后采用RBL-2H3细胞脱颗粒试验,进行潜在致敏蛋白的致敏性验证。结果DEAE-52阴离子交换树脂洗脱后,免疫印迹法检测到0.04 mol/L、0.05 mol/L NaCl-TBS洗脱液中均含有潜在致敏蛋白成分。Sephadex G-100大孔树脂洗脱后,经Tricine-SDS-PAGE凝胶分析和Western Blot免疫印迹分析,证实洗脱峰B为目标致敏蛋白成分,其分子量在35~48 kD。结论红花注射液中存在致敏蛋白成分,其分子量在35~48 kD。

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