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花生类受体蛋白激酶基因AhBAK1的克隆及原核表达

         
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摘要

BAK1是富含亮氨酸重复序列型类受体蛋白激酶,参与调控植物先天免疫反应过程中的程序性细胞死亡过程.实验室已有的花生铝胁迫转录组数据揭示AhBAK1为铝胁迫响应基因.为研究其在花生抗铝机制中的作用,该文分析了铝胁迫下AhBAK1在花生耐铝品种'99-1507'和铝敏感品种'中花2号'('ZH2')根尖中的转录变化,采用RT-PCR技术进行扩增AhBAK1的完整CDS序列,并对序列特征进行了分析.结果表明:AhBAK1显著响应铝处理,且在'99-1507'中有着更强的诱导表达;AhBAK1包括625个氨基酸残基,属富亮氨酸重复区类受体激酶,具跨膜域和蛋白激酶催化结构域,不存在信号肽,预测定位于细胞质膜;我们进一步构建了含有AhBAK1激酶域的pGEX-6p-1-AhBAK1-CD重组质粒,体外诱导表达出约70 kD可溶性蛋白,经凝胶亲和层析纯化,最终得到基于蛋白印迹实验(Western Blot)验证正确的重组蛋白.为进一步研究AhBAK1的生物学功能和生化功能奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《广西植物》 |2021年第4期|573-583|共11页
  • 作者

    韦莉; 李霞; 黄舒婷; Chanthaphoone KEOVONGKOD; 何龙飞; 詹洁; 王爱勤; 肖冬;

  • 作者单位

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西高校作物栽培学与耕作学重点实验室 530004 南宁;

    广西大学 农学院 植物科学国家级实验教学示范中心 南宁530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西高校作物栽培学与耕作学重点实验室 530004 南宁;

    广西大学 农学院 植物科学国家级实验教学示范中心 南宁530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西高校作物栽培学与耕作学重点实验室 530004 南宁;

    广西大学 农学院 植物科学国家级实验教学示范中心 南宁530004;

    广西大学 农学院 南宁 530004;

    广西高校作物栽培学与耕作学重点实验室 530004 南宁;

    广西大学 农学院 植物科学国家级实验教学示范中心 南宁530004;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 植物细胞遗传学;
  • 关键词

    花生; AhBAK1; 基因克隆; 原核表达; 蛋白纯化;

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