阳离子脂质体介导肽核酸转染K562细胞的研究

王偲颖; 林靖; 韩媛媛; 张华; 黄盛文

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阳离子脂质体介导肽核酸转染K562细胞的研究

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目的优化阳离子脂质体介导肽核酸(PNA)转染K562细胞的条件.方法以阳离子脂质体lipofectamine 2000为载体,将标记有FITC荧光基团的PNA转染K562细胞,在荧光显微镜下观察并计算其转染效率,采用Cell Counting Kit(CCK-8)检测其细胞毒性.应用正交试验筛选出最佳的PNA和脂质体的用量及比例,并优化稀释用培养基血清浓度,以获得最优的转染效果.结果以2.5× 105/mL～3×105/mL的细胞密度接种,100 μL/孔的培养基中加入PNA 6.25 pmol,PNA与脂质体的体积比为1∶3.5,稀释用培养基未加胎牛血清时,细胞转染效率和细胞毒性最佳,转染效率为87.2％,细胞存活率(RGR)为94.1％.结论 PNA可通过阳离子脂质体转染进入K562细胞,优化条件后得到的细胞转染效率和细胞存活率能够满足基因表达研究的实验要求.

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来源
《贵州医药》 |2016年第4期|341-343|共3页
作者
王偲颖; 林靖; 韩媛媛; 张华; 黄盛文;
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作者单位

贵州医科大学附属贵州省人民医院检验科,贵州贵阳550002;

贵州医科大学附属贵州省人民医院输血科,贵州贵阳550002;

贵州医科大学附属贵州省人民医院检验科,贵州贵阳550002;

贵州医科大学附属贵州省人民医院检验科,贵州贵阳550002;

贵州医科大学附属贵州省人民医院检验科,贵州贵阳550002;

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正文语种 chi
中图分类 R394.3;
关键词
K562细胞; 肽核酸; 脂质体转染; 细胞毒性;

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