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miR-138调控Notch-1信号通路对脑胶质瘤细胞增殖与分化作用及其机制研究

     
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目的 探讨miR-138调控Notch-1信号通路对脑胶质瘤细胞增殖及分化的作用及其机制.方法 收集18例鉴定为脑胶质瘤患者的脑组织活检标本和5例神经外科脑外伤手术患者的正常脑组织活检标本.培养人脑胶质瘤细胞株U-87 MG分别转染miR-138 mimics、miR-138 inhibitor为Mimics组和Inhibitor组,设立空白对照Blank组.采用qRT-PCR检测组织和细胞miR-138表达水平,采用Western Blot法检测组织和细胞Notch-1和Hes-1水平,采用半定量PCR检测组织和细胞Notch1 mRNA和Hes1 mRNA水平.采用CKK 8实验检测细胞增殖情况,WST-8法检测细胞分化情况.结果 与WHO分级I级比较,脑胶质瘤组织WHO分级Ⅱ级和Ⅲ级miR-138相对表达量下降;与正常脑组织比较,病理类型为星形细胞瘤、间变少突胶质细胞瘤和间变星形细胞瘤的脑胶质瘤组织miR-138相对表达量均下降,Notch-1蛋白、Hes-1蛋白、Notch1 mRNA和Hes1 mRNA相对表达量均升高,差异均有统计学意义(P<0.05).脑胶质瘤细胞株U-87 MG Blank组、Mimics组、Inhibitor组的miR-138相对表达量分别为0.63±0.02、0.92±0.05、0.46±0.05,差异具有统计学意义(F=101.966,P<0.001);3组间Notch-1蛋白、Hes-1蛋白、Notch1 mRNA和Hes1 mRNA的相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05),其中Mimics组相对表达量最低,Inhibitor组相对表达量最高.CCK8实验结果显示,与Blank组比较,Mimics组24、48、72 h时细胞增殖均下降,Inhibitor组24、48、72 h时细胞增殖均升高,差异均有统计学意义(P<0.05).WST-8检测结果显示,在3、5、7 d与Blank组的活细胞数比较,Mimics组均降低,Inhibitor组均升高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 不同WHO分级与病理类型分型的脑胶质瘤患者的miR-138水平存在差异,miR-138可能通过负向调控Notch-1信号通路抑制脑胶质瘤细胞U-87 MG增殖和分化.

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