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内源性Relaxin-1 Relaxin-3及其受体LGR7表达水平在小鼠心房颤动心肌纤维化中的作用

         
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目的:分析内源性松弛素(Relaxin,RLX)-1、Relaxin-3、松弛素受体(LGR7)表达水平在在心房颤动心肌纤维化中的作用.方法:腹腔注射ISO构建心房颤动模型,40只C57B62小鼠随机分为空白对照组、模型组、模型组+RLX1、模型组+RLX3组,每组10只;模型组+RLX1、模型组+RLX3分别腹腔注射RLX1、RLX3,空白对照组、模型组注射等量生理盐水;一周后检测心肌胶原沉积纤维面积、羟脯氨酸含量,应用RT-PCR法、Western Blot法检测Relaxin 1、Relaxin 3、LGR7 mRNA及蛋白表达;免疫组化法检测α-SMA积分光密度(IOD),Western Blot法检测心肌α-SMA蛋白表达;Real-Time PCR、West-ern Blot法测定I型胶原蛋白(collagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、MMP-2、MMP-9、MMP-13、金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)mRNA及蛋白表达;RT-PCR法检测心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、血管紧张素受体1(AT1R)、血管紧张素受体2(AT2R)、醛固酮(ALD)及盐皮质激素受体(MR)mRNA表达.结果:①较空白对照组,模型组室间隔、右心室及左心室心肌胶原沉积纤维面积百分比,心肌羟脯氨酸含量均明显上升(P<0.05);与模型组比较,模型组+RLX1、模型组+RLX3室间隔、右心室及左心室心肌胶原沉积纤维面积百分比,心肌羟脯氨酸含量明显下降(P<0.05).②与空白对照组比较,模型组Relaxin 1、Relaxin 3、LGR7 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,模型组+RLX1、模型组+RLX3 Relaxin 1、Relaxin 3、LGR7 mRNA及蛋白表达明显上升(P<0.05).③与空白对照组比较,模型组α-SMA IOD、α-SMA蛋白,collagenⅠ、collagenⅢmRNA及蛋白表达明显上升(P<0.05),与模型组比较,模型组+RLX1、模型组+RLX3α-SMA IOD、α-SMA蛋白、collagenⅠ、collagenⅢmRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05).④与空白对照组比较,模型组MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13 mRNA及蛋白表达明显上升,TIMP-1 mRNA及蛋白表达明显下降(P<0.05);与模型组比较,模型组+RLX1、模型组+RLX3 MMP-1、MMP-2、MMP-9、MMP-13 mRNA及蛋白表达明显下降、TIMP-1 mRNA及蛋白明显上升(P<0.05).⑤与空白对照组比较,模型组AngⅡmRNA、AT1R mRNA、AT2R mRNA、ALD mRNA、MR mRNA水平明显上升;与模型组比较,模型组+RLX1、模型组+RLX3 AngⅡmRNA、AT1R mRNA、AT2R mRNA、ALD mRNA、MR mRNA明显下降.结论:心房颤动小鼠心肌存在纤维化病理改变,且内源性Relaxin-1、Relaxin-3、LGR7低表达,Relaxin或可通过AngⅡ及ALD系统拮抗心肌纤维化.

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