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赖氨酰氧化酶样蛋白-2对喉癌细胞凋亡和化疗敏感性的影响

         

摘要

目的:探讨赖氨酰氧化酶样蛋白-2(LOXL2)基因沉默对人喉鳞癌Hep2细胞凋亡、增殖及化疗敏感性的影响。方法:实验分为对照组(Control)、转染LOXL2无关片段组(LOXL2-NC)、转染LOXL2 siRNA组(LOXL2-siRNA)以及转染转染Lipofectamine 2000组(Lipofectamine 2000)。以Lipofectamine 2000为转染试剂转染人喉鳞癌Hep2细胞,构建LOXL2基因的shRNA表达载体,运用RNAi技术转染喉癌细胞后,观察喉癌细胞的凋亡及增殖情况。采用Western blot检测各组Hep2细胞中LOXL2蛋白表达水平;采用MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡率,将顺铂(DDP)作用于上述各组细胞后采用平板克隆形成实验、MTT法及流式细胞仪检测各组细胞对化疗敏感性的影响。结果:与Control组相比,LOXL2-siRNA组细胞增殖明显被抑制,细胞凋亡指数升高(P<0.01),加入不同浓度DDP后LOXL2-siRNA组细胞克隆形成率降低、集落抑制率升高、细胞存活率明显下降(P<0.01)。结论:沉默LOXL2能够抑制Hep2细胞增殖,促进细胞凋亡以及增加Hep2细胞对顺铂化疗的敏感性。

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