人α-防御素-3基因乳腺特异性表达载体的构建及在兔乳腺中的瞬时表达

张鹏; 张勇; 赵兴绪; 李银聚; 程相朝; 张春杰; 吴庭才

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为探索人α-防御素-3（HNP-3）基因在兔乳腺中特异性表达的可行性,将HNP-3基因与大鼠乳清酸蛋白（WAP）基因5′端调控区序列融合,定向克隆到PEGFP-1表达载体EGFP基因上游,在EGFP基因3′端加上His标签蛋白基因序列,构建了HNP-3基因乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-S,将pEGFP-WAP-HNP-S与脂质体包裹后通过乳腺导管注射法转入妊娠母兔乳腺中,Westernblot和ELISA检测HNP-3融合基因在乳腺中表达和融合蛋白的表达水平,并用Ni亲和层析柱进行纯化。结果表明:分娩后初乳中即有分子质量为40kD的HNP-3融合蛋白表达,分娩后第4d达到高峰,表达量为265ng/mL。实验证明HNP-3融合基因在乳腺组织中能够特异性的表达。

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来源
《湖南农业科学》 |2010年第13期|152-155|共4页
作者
张鹏; 张勇; 赵兴绪; 李银聚; 程相朝; 张春杰; 吴庭才;
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作者单位

1. 甘肃农业大学动物医学院 2. 河南科技大学动物科技学院;

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正文语种 chi
中图分类病理生理学;
关键词
人α-防御素-3; WAP启动子; Ni亲和层析柱纯化;

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