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全人源抗人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-R1单克隆抗体诱导肿瘤细胞凋亡的体外实验研究

         

摘要

目的 探讨本研究组制备的全人源抗人TRAIL-R1单克隆抗体TRAIL-R1-422 (TR1-422)诱导肿瘤细胞凋亡的作用.方法 利用竞争ELISA法鉴定TR1-422与TRAIL-R1结合特异性;流式细胞分析检测TR1-422与Jurkat细胞表面TRAIL-R1的结合能力;细胞计数法分析TR1-422在不同时间点对Jurkat细胞生存和细胞增殖的影响;镜下观察TR1-422对肿瘤细胞的作用;Annexin V/PI双染色评价TR1-422诱导Jurkat细胞凋亡的作用.结果 TR1-422抗体与重组TRAIL-R1抗原特异性结合;与Jurkat 细胞表面TRAIL-R1结合,与无相关IgG抗体组比较荧光强度变化72.3%.1μg/ml TR1-422与10 μg/ml抗人IgG交联作用于Jurkat细胞在不同时间点(24h和48 h)的生存率分别为72.57%和64.08%,对照组分别为96.14%和95.69%,差异有统计学意义(t=2.534,P<0.05;t =3.147,P<0.05);镜下观察,72 h后Jurkat细胞出现大量死亡;24 h时Annexin V阳性率达30%,而TR1-422单独作用为12.8%(t=2.355,P<0.05).结论 本研究证实制备的全人源抗人TRAIL-R1单抗与抗体交联作用可促进肿瘤细胞凋亡,为抗肿瘤治疗提供基础数据.

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