采用通用引物PCR及RFLP快速检测下呼吸道感染常见病原菌的临床研究

王蓉美; 蔡庆; 高和; 李东江; 马文杰; 张波

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采用通用引物PCR及RFLP快速检测下呼吸道感染常见病原菌的临床研究

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目的采用聚合酶链反应(PCR)配合限制性酶切片段多态性(restriction fragment length polymorphism,RFLP)分析检测下呼吸道感染的常见病原菌,探讨其在临床快速诊断细菌感染中的应用价值.方法在下呼吸道感染的住院患者中筛选出合格痰标本125例,分为2份,1份行痰培养作为对照,另1份以16S rRNA基因为靶序列,在其保守区建立通用引物进行PCR扩增,再分别用限制性内切酶HaeⅢ、MnlⅠ、AluⅠ、DdeⅠ和BstBⅠ酶切,进一步行RFLP分析,根据下呼吸道常见病原菌建立的特异酶切图谱诊断鉴定细菌,比较两种方法的检测结果.结果 125例合格痰标本中,PCR配合RFLP检测阳性85例,阳性率为68.0%,痰培养阳性72例,阳性率为57.6%,前者明显高于痰培养(P<0.01),其中肺炎链球菌及流感嗜血杆菌阳性率明显高于痰培养,部分革兰阴性杆菌阳性率也高于培养组,但部分革兰阳性球菌(溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌及屎肠球菌)阳性率较培养组低于痰培养.结论 PCR配合RFLP分析方法检测下呼吸道感染病原菌较常规培养方法敏感快捷,是一种具有临床应用价值的快速诊断方法.

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来源
《国际呼吸杂志》 |2009年第17期|1025-1028|共4页
作者
王蓉美; 蔡庆; 高和; 李东江; 马文杰; 张波;
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作者单位

空军总医院;

空军总医院;

空军总医院;

北京空军总医院;

空军总医院;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类
关键词
下呼吸道感染; 通用引物; 聚合酶链反应; 限制性酶切片段多态性; 16S rRNA基因;

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