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流式细胞分选仪高效分选条件的探索

摘要

目的 针对如何提高流式分选试验分选得率和纯度的问题,建立高效的流式细胞分选条件,为流式分选技术应用提供参考依据.方法 2019年10月至2020年6月设计以BD FACS Sorp Aria Ⅱ为例,首先以微球样品作为研究对象,经检测不同分选速率、不同分选模式及不同喷嘴条件下的分选结果,分析其影响因素,并以优化的条件尝试高效分选naǐve T细胞.结果 70 μm喷嘴,purity模式下,flow rate 1.0、3.0、5.0、7.0 4种速率的分选纯度均达到98%以上,但flow rate值越高,分选得率越低.不同分选模式分选时,yield模式的分选效率和得率都是最高的,分别为(99.67±0.33)%、(79.78±7.14)%,但其纯度显著低于另2种模式(均P<0.05).3种喷嘴条件下分选后的纯度均达到98%以上,且得率差异无统计学意义(P>0.05).结论 分选原代naǐve T细胞,70 μm喷嘴,flow rate 1.0,purity模式条件最合适.

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