大头典竹ISSR反应体系建立与优化

瞿印权; 徐雯; 沈露; 何天友; 魏建文; 荣俊冬; 郑郁善

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大头典竹ISSR反应体系建立与优化

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以大头典竹叶片为材料,采用单因素分析法和正交设计直观分析法,对影响PCR扩增效果的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板DNA含量这5个PCR反应体系主要成分以及退火温度和循环次数进行筛选.通过研究建立了适合大头典竹的ISSR-PCR反应体系:20 μL反应液中含2.5 mmol/L Mg2+,0.25 mmol/L dNTPs,1.25 UTaqDNA聚合酶,0.6μmol/L引物,10 ng模板DNA,2μL 10×Buffer,10.55 μL ddH2O.相应反应程序为94℃预变性5 min;94℃变性45 s,54.5℃退火30 s,72℃延伸90 s,35个循环;72℃延伸10 min,4℃保存.应用建立的优化反应体系成功地筛选出16条多态性较高的引物,表明该体系具有较高稳定性、重现性、适用性,可较好地应用于大头典竹不同地理种源间的遗传多样性研究.

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来源
《江苏农业科学》 |2017年第10期|34-39|共6页
作者
瞿印权; 徐雯; 沈露; 何天友; 魏建文; 荣俊冬; 郑郁善;
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作者单位

福建农林大学林学院;

福建福州350002;

福建农林大学林学院;

福建福州350002;

福建农林大学林学院;

福建福州350002;

福建农林大学艺术学院园林学院;

福建福州350002;

福建省东山赤山国有防护林场;

福建东山363400;

福建农林大学林学院;

福建福州350002;

福建农林大学林学院;

福建福州350002;

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正文语种 chi
中图分类 S795.901;
关键词
大头典竹; ISSR; 反应体系; 优化;

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