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拟南芥PTR3基因过表达载体构建及转基因植株的获得

         

摘要

[目的]构建PTR3基因的过表达栽体,并建立PTR3基因过表达植株,为进一步研究PTR3基因在调控重金属胁迫应答中的功能提供理论依据.[方法]提取野生型拟南芥总mRNA,并以反转录的cDNA为模板扩增出PTR3基因CDS全长,通过限制性核酸内切酶酶切、T4DNA连接酶连接,将该基因连接到带有35S启动子的pBI121载体上.[结果]将重组载体转化至农杆菌GV3101菌株,通过浸花法将重组载体转化到野生型植株中,通过抗性筛选和遗传鉴定获得纯合的PTR3转基因阳性植株.[结论]PTR3过表达载体构建成功并获得转基因阳性植株,为研究PTR3基因的分子功能奠定基础.

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