家蚕核型多角体病毒BmOrf99的研究

张曦; 胡小龙; 薛仁宇; 曹广力; 贡成良

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家蚕核型多角体病毒BmOrf99的研究

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摘要

[目的]探讨家蚕核型多角体病毒BmOrf99在杆状病毒生命周期中的功能.[方法]运用Red同源重组技术构建BmOrf99缺失型重组病毒,研究BmOrf99对病毒复制、BV产生和病毒形态发生的影响.[结果]病毒转染细胞1.5h可检测到BmOrf99表达;通过Red重组系统构建敲除型病毒BmNPV-BmOrf99KO-polh-GFP,转染结果显示,敲除BmOrf99病毒仍能增殖复制,透射电镜观察显示,BmOrf99敲除对病毒粒子装配和多角体形成无明显影响.病毒DNA转染后24～72 h,敲除型病毒转染细胞培养上清BV水平略高于对照病毒BmNPV-BmOrf99WT-polh-GFP;转染后72 h,前者细胞培养上清TCID50略高于后者;转染6～72 h,敲除型病毒转染细胞中病毒DNA水平高于对照病毒转染细胞;敲除型病毒感染72 h后,细胞中BmOf998a表达水平比对照组提高2.21倍.[结论]BmOrf99为病毒早期基因,且复制非必需,缺失可促进病毒DNA复制,略增加BV水平,但对病毒形态发生无影响,BmOrf-99有可能通过调节病毒其他基因的表达而发挥作用.

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来源
《安徽农业科学》 |2015年第21期|43-50|共8页
作者
张曦; 胡小龙; 薛仁宇; 曹广力; 贡成良;
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作者单位

苏州大学基础医学与生物科学学院;

江苏苏州215123;

苏州大学基础医学与生物科学学院;

江苏苏州215123;

苏州大学基础医学与生物科学学院;

江苏苏州215123;

苏州大学基础医学与生物科学学院;

江苏苏州215123;

苏州大学基础医学与生物科学学院;

江苏苏州215123;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
家蚕核型多角体病毒; BmOrf99; 敲除; BV; ODV;

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