辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选

张佳琦; 吕庆芳; 董黎梨; 李映志; 叶春海

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辣椒SRAP-PCR反应体系优化及杂交群体多态性引物筛选

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[目的]对辣椒SRAP反应体系进行研究和优化,并利用优化体系对164对多态性引物进行筛选.[方法]采用单因素随机试验设计和L25(65)正交试验设计对辣椒SRAP反应体系中6种关键因素(退火温度、Taq DNA聚合酶、Mg2、dNTPs、引物、模板DNA)进行体系优化,并以“泡椒”×“青皮大椒”的亲本和F1代为材料,利用聚丙烯胺酰胺凝胶进行筛选.[结果]辣椒SRAP-PCR的最佳反应体系为:退火温度35.5℃,Taq DNA聚合酶1.0U,模板DNA 2.25 ng/μl,dNTPs 0.2 mmol/L,引物0.4μmoL/L,Mg2+2 mmol/L,总体积为20μl.利用该体系,从164对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、条带稳定的31对引物组合.[结论]该体系的建立与多态性引物组合的筛选为SRAP标记技术在辣椒育种中的应用奠定了基础.

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来源
《安徽农业科学》 |2014年第7期|1913-19161920|共5页
作者
张佳琦; 吕庆芳; 董黎梨; 李映志; 叶春海;
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作者单位

广东海洋大学;

广东湛江524088;

广东海洋大学;

广东湛江524088;

广东海洋大学;

广东湛江524088;

广东海洋大学;

广东湛江524088;

广东海洋大学;

广东湛江524088;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类辣椒;
关键词
辣椒(Capsicum spp.); 正交试验设计; 单因素随机试验设计; SRAP; PCR;

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