MCL-1原核表达载体构建及重组蛋白表达

余美华; 张姝芳; 倪晓敏; 袁进强; 胡巧玲; 万文彬; 杨仙玉

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MCL-1原核表达载体构建及重组蛋白表达

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[目的]构建日本蟾蜍(Bufo japonicus formosus)髓细胞白血病基因-1(myeloid cell leukemia-1,mcl-1)的原核表达载体并诱导其重组蛋白表达.[方法]通过PCR方法扩增日本蟾蜍皮肤mcl-1开放阅读框,将其插入到原核表达载体pET-28b中.经菌落PCR、DNA限制性内切酶消化筛选阳性克隆,并通过DNA测序确定原核表达载体pET-28 b-mcl-1构建成功.将pET-28b-mcl-1转入大肠杆菌(E.coli)感受态细胞BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达,并用SDS-PAGE对重组蛋白的表达进行检测.[结果]原核表达载体pET-28b-mcl-1构建成功;重组蛋白在大肠杆菌中成功表达.[结论]原核表达载体的构建及重组蛋白的表达,为后续MCL-1的纯化、抗血清的制备及生理功能检测奠定了基础.

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来源
《安徽农业科学》 |2013年第18期|7742-77447977|共4页
作者
余美华; 张姝芳; 倪晓敏; 袁进强; 胡巧玲; 万文彬; 杨仙玉;
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作者单位

浙江农林大学动物科技学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学林业与生物技术学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学动物科技学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学林业与生物技术学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学动物科技学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学动物科技学院;

浙江临安311300;

浙江农林大学动物科技学院;

浙江临安311300;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类农业生物工程;
关键词
MCL-1; 原核表达载体; 重组蛋白表达;

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