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细胞和个体水平沉默效应的差异

         
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摘要

[目的]研究3种不同长度的四联shRNA载体及其在细胞与个体水平的沉默效应差异.[方法]以EGFP为靶标基因,用hU6、mU6、h7SK、hHl 4种启动子,构建21、27、29 bp的3种四联沉默载体,通过转染Vero细胞和注射小鼠肌肉,以实时荧光定量PCR的方法检测绿色荧光蛋白基因的mRNA水平.[结果]3种载体都有很强的沉默效应,其在细胞水平上的沉默效应远高于个体水平上,可以通过未成年鼠的肌肉注射进行转基因.[结论]多位点串联表达shRNA是一种可以达到较好干扰效果的方法,肌肉注射将是一个简便的转基因途径.%[Objective] The aim was to compare the silencing effect of three vectors containing different lengths of shRNA quartet at cellular level and individual level. [Result] To silence EGFP gene, three shKNA quartets of 21, 27 and 29 bp formed by hU6, mU6, h7SK and hH1 promoters were constructed and then cloned into silent vectors. All/r the vectors were transfected into Vero cells or injected into mouse muscle, real-time fluorescence quantitative PCR was conducted to detect the mRNA level of EGFP gene. [ Result] All the three vectors showed strong silence effect; in which, the silencing effect at the cellular level was far higher than that at individual level. [Conclusion] Tandem shR-NA expression vector may show better silencing effect; intramuscular injection maybe a transgenic method for baby mouse.

著录项

  • 来源
    《安徽农业科学》 |2011年第29期|17792-1779417832|共4页
  • 作者

    郑新民; 刘中华; 程妮; 肖红卫; 乔宪凤; 毕延震;

  • 作者单位

    湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;

    动物胚胎工程与分子育种重点实验室;

    湖北武汉430064;

    山西运城学院生命科学系;

    山西运城712100;

    湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;

    动物胚胎工程与分子育种重点实验室;

    湖北武汉430064;

    湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;

    动物胚胎工程与分子育种重点实验室;

    湖北武汉430064;

    湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;

    动物胚胎工程与分子育种重点实验室;

    湖北武汉430064;

    湖北省农业科学院畜牧兽医研究所;

    动物胚胎工程与分子育种重点实验室;

    湖北武汉430064;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 农业化学分析方法;
  • 关键词

    细胞; 个体; 沉默; 差异;

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